期刊简介
中华医学会、中国医学科学院生物医学工程所主办。本刊专门报导国内外生物医学工程学科领域的新技术、新进展、新动向与新成果，促进国际生物医学工程学科的学术交流。本刊不仅全面、及时地介绍和跟踪了国际生物医学工程的研究进展与趋势，也反映了我国生物医学工程学科的研究动向和关注热点。读者对象是生物医学工程科研工作者、医生和临床工程人员、高等院校有关专业师生及研究生等。主要栏目设有专家论坛、综述、论著、研究简报、新技术介绍及消息等。本刊为中文核心期刊(北京大学图书馆)及中国科技论文统计源期刊(中国科技核心期刊)。
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首页>国际生物医学工程杂志
- 杂志名称：国际生物医学工程杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华医学会;中国医学科学院生物医学工程研究所
- 国际刊号：1673-4181
- 国内刊号：12-1382/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：在首届《CAJ－CD规范》执行评优活动中荣获《CAJ－CD规范》执行优秀奖期刊收录：国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中)
人组织因子途径抑制因子在毕赤酵母中高拷贝表达
程旭；徐伟杰；宋丽萍；刘兰霞；董霞；张海玲；朱敦皖；冷希岗
关键词：组织因子途径抑制因子, 毕赤酵母, 表达
摘要：目的 构建高拷贝表达重组人组织因子途径抑制因子的毕赤酵母并对蛋白表达条件进行初步优化,为相关研究奠定基础.方法 将PCR扩增得到的TFPI cDNA片段与表达质粒pPIC9K连接构建重组质粒rhTFPI-pPIC9K,采用PCR方法及DNA测序对其进行鉴定.将重组质粒转化酵母细胞GS115,利用G418抗性实验筛选含有高拷贝TFPI cDNA的毕赤酵母菌株,采用Western Blot和TFPI检测试剂盒分析重组蛋白表达.通过改变诱导温度、诱导时间及甲醇浓度对重组蛋白表达条件进行初步优化.结果 PCR扩增rhTFPI-pPIC9K得到预期的扩增条带(1.2 kb),经酶切图谱分析及测序确认成功构建表达质粒rhTFPI-pPIC9K.实时定量PCR结果显示,通过G418筛选获得了含高拷贝基因的酵母细胞,Western Blot 结果显示含基因拷贝数与蛋白表达量呈正相关.通过对表达条件的优化,明显提高了TFPI重组蛋白的表达量,重组TFPI表达量高达(9.95+0.78)mg/L,活性达到(3.91+1.37)U/mL.结论 成功构建了高效表达TFPI重组蛋白的毕赤酵母细胞株,为TFPI功能研究及在相关疾病防治中的应用提供了坚实的实验基础.
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